你最好做到每天都去探望探望它們，看看他們的成長情況

1、檢查培養液顏色與透明度的變化，顏色變黃，說明PH值下降;變紅或紫紅色，說明PH值上升，細胞生長停滯、死亡，一般生長穩定的細胞2-3天換液一次，生長緩慢的細胞可3-4天換液一次。

2、觀察細胞生長狀態，細胞長滿瓶底的80%，應及時傳代。

3、觀察細胞形態變化，細胞透明度大、折光性強、輪廓清晰為佳。

4、注意微生物污染，常常出現培養液混濁，液體內漂菌絲或細胞菌，不僅僅指微生物，包括所有混入培養環境中的細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物及細胞。

你培養的細胞被污染了，無非是下面幾個污染途徑：

1、空氣是微生物傳播的最主要途徑，操作時盡量避免說話、咳嗽、打噴嚏;

2、使用的培養器械及器皿清洗消毒不*;

3、培養兩種以上細胞時，操作不規范，可能導致細胞交叉污染;

4、血清有問題，可能血清在生產時就已經被支原體或病毒污染;

5、原代培養的污染多數來源于組織樣本。

這里的工作區域包括實驗臺、超凈臺、培養箱（水槽除外）、液氮罐、移液器、門把手等細胞培養的環境。

使用德國MB公司生產的支原體祛除噴霧或濕巾（品名：Mycoplasma-off™），可在5-10分鐘清除支原體，高效快速，操作方便。

產品特點及原理：

1）快速有效

噴霧劑和濕巾中含有支原體專用殺除劑Mynox®，可在幾分鐘內迅速殺除支原體。

與傳統的化學試劑熏蒸方法相比，更加安全；與傳統酒精處理、紫外線照射方法相比更有效！

2）廣譜抗菌

不僅能祛除支原體，而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。

3）無腐蝕性和致癌性

乙醇作為溶劑，無腐蝕性和致癌性成分。

4）操作簡便

即用型消毒液，可以快速簡單地保持工作區的清潔干凈。

使用方法及步驟：

 

噴霧劑:

注：對于細胞培養箱，內部噴灑支原體祛除噴霧或用濕巾擦拭后，應打開箱門通風至少1小時。如培養箱帶熱滅活功能，可開啟該功能以替代風干。

 

濕巾:

對于移液器，門把手，電子設備等，可使用支原體祛除濕巾。擦拭后，應讓其被消毒物體的表面保持濕潤，再讓其自然風干。

培養箱水槽和水浴鍋中預防支原體污染的方法

細胞培養環境中，培養箱水槽、水浴鍋經常會有支原體以及各種細菌、霉菌滋生，稍有不慎或清洗不及時，水槽中的水源即會成為細胞污染的重要來源。

保持水槽的潔凈，對細胞培養的順利進行非常重要。

眾多實驗室日常都在使用德國MB公司生產的Water Shield支原體污染防護劑（水槽用）。Water Shield可持續作用四周，使水源避免受到支原體、細菌、酵母、霉菌和孢子的污染。

 

產品特點：

1）長效。Water Shield含表面活性劑、季銨鹽和絡合劑，不易揮發，可持續作用4周。

2）安全。不含醛類或疊氮化物，對細胞無毒害。

3）廣譜。預防支原體、細菌、酵母菌、霉菌和孢子污染。

4）方便。Water Shield按1:200比例，直接加入水中，使用方便。

5）不產生水垢。

操作步驟：

1）Water Shield和蒸餾水可直接加入培養箱水槽或水浴鍋中。

2）Water Shield按1:200比例使用，例如：1000ml蒸餾水+5ml Water Shield，或10L蒸餾水+50ml Water Shield。

3）4周左右清洗水槽，換水，重新加入Water Shield。

 

注意事項：

避免吸入。眼睛接觸或長時間皮膚接觸可能會產生刺激性。因而，使用試劑時應戴上護目鏡和一次性手套。一旦皮膚接觸，應用大量水沖洗。

Water Shield對玻璃、陶瓷、塑料、橡膠、鋼制品、貴金屬和其他金屬安全性良好。