
把細胞從體內迎進培養(yǎng)皿,第1件事就是替它們準備“新房+餐廳"。基礎培養(yǎng)基提供糖分、氨基酸與維生素,相當于“主食";胎牛血清(FBS)則像“配菜+信號塔",負責補給附著因子、生長信號和緩沖蛋白。如何選擇一瓶適用且穩(wěn)定的血清,往往決定了后續(xù)實驗的流暢度。
一、血清的“角色清單"
1. 附著因子:纖維連接蛋白、玻連蛋白幫助貼壁細胞展開,減少圓縮。
2. 生長信號:胰島素樣因子、成纖維細胞刺激物可縮短倍增時間,提高收獲量。
3. 緩沖與保護:天然轉鐵蛋白、銅藍蛋白結合游離金屬,減輕氧化壓力;白蛋白維持滲透壓,使pH波動更溫和。
二、挑選前的三問
1. 細胞類型:原代細胞建議用低內毒素批次,連續(xù)傳代系對血清要求相對寬松。
2. 實驗周期:長期項目優(yōu)先鎖定大包裝同批號,避免中途換批引起生長差異。
3. 檢測需求:若后續(xù)要做蛋白或代謝分析,可選經過額外病毒檢測與電泳篩查的特級血清,降低背景干擾。
三、小試—記錄—鎖定
1. 預實驗:設置5%、8%、10%三個濃度梯度,比較24 h貼壁率和48 h倍增時間,選增速快且形態(tài)良好的濃度作為工作濃度。
2. 批號備案:保存質檢報告與外觀照片,建立“批號-時間-結果"電子檔案,方便橫向對比。
3. 分裝策略:50 mL/管立即放入-20 ℃,避光存放;用時取一管,24 h內用完,不要反復升溫。
四、使用細節(jié)
1. 融化:4 ℃過夜→25 ℃水浴補足→輕晃混勻,避免高溫長泡導致蛋白析出。
2. 減少沖擊:先加基礎培養(yǎng)基,再緩緩倒入血清,邊加邊搖,防止高濃度蛋白瞬間聚集。
3. 避光保存:棕色袋或鋁箔紙包裹,減緩核黃素等光敏成分分解。
五、成本與效益平衡
大包裝單價低,但需確保半年內用完;小包裝靈活,適合多細胞系交叉實驗。可按“急用先小、長線購大"的原則組合采購,既節(jié)省經費,又降低批間差異。
六、結語
基礎培養(yǎng)基決定細胞“能不能活",胎牛血清影響細胞“活得好不好"。把選型、分裝、保存做成標準化流程,細胞便會以穩(wěn)定增殖和均一數(shù)據(jù)回報你的嚴謹。讓每一次培養(yǎng)瓶開啟,都成為一個可重復、可信賴的新起點。