臨床項目申報與支原體檢測

細胞體外培養過程中，很容易受到支原體污染的困擾。

在生物制品和細胞治療領域，支原體檢查是保證產品和治療安全的重要一環。生物源性原材料、采用細胞培養技術制備的疫苗、抗體，以及細胞或基因治療產品在生產過程的不同階段都要進行支原體污染的檢查。

歐洲藥典規定對細胞治療產品需要進行嚴格的支原體檢測；美國FDA規定為了提高細胞生物制品安全性，需要進行支原體污染檢測；我國藥典規定主細胞庫、工作細胞庫、病毒種子批、對照細胞以及臨床治療用細胞應進行支原體檢測。

但在項目申報前，需要進行支原體檢測。

傳統支原體檢查方法是培養法和指示細胞培養法，并為藥典所認可和收錄。但由于這兩種方法耗時又耗力，因此，近年來，『支原體qPCR檢測』在工業領域的應用越來越多。

但在項目申報前，先需要進行方法學驗證，依據藥典，在檢測限、特異性和耐用性方面達到要求后，才能替代傳統的檢查方法。

適合臨床項目申報的支原體檢測和方法驗證，德國Minerva Biolabs（簡稱德國MB）公司已有成熟的產品及商業化應用。

不僅提供有符合國際藥典的『支原體qPCR檢測』試劑盒，更有一系列支原體標準品及輔助產品，用于qPCR方法的全面驗證。

各國藥典對支原體核酸擴增檢測方法（簡稱NAT法）的驗證要求略有出入，但均要求對檢出限、特異性和耐用性進行驗證。

在檢測方法上，均建議先做樣本的支原體DNA抽提，再進行支原體檢測。

如使用商品化試劑盒，則除了需要試劑盒生產商提供完整的方法學驗證數據外，還需要使用者驗證試劑盒對其樣本的適用性，以及試劑盒表現出預期的性能（例如檢測限、耐用性、是否存在與細菌的交叉反應）進行證明。

德國MB公司提供有10CFU檢測限的支原體高敏標準品，可同時用于檢測限和耐用性的驗證。