常規PCR法：是根據支原體核糖體16s-23s rRNA的特異保守序列設計引物，對待檢樣本DNA進行擴增，通過對擴增產物的大小分析作出診斷。用于【細胞培養中支原體】污染的檢測。本文締一生物為您做一下分享。

 

優點：①靈敏度高，特異性好。②時間短，2-3小時出結果。③符合歐洲藥典。④操作簡單。

缺點：①對于已做支原體滅活處理的樣品，由于支原體DNA仍舊存在其中，PCR結果會出現假陽性。（可用培養法做補充驗證）。②不同廠家生產的試劑盒質量差異巨大（由于引物及內在設計不同），需謹慎選擇，盡量在專業人員推薦指導下使用。

『支原體常規PCR檢測試劑盒』介紹

德國MB公司生產的支原體常規PCR檢測試劑盒，依據操作步驟的細微差別，分一步法和經典法兩類。此兩類試劑盒較其他廠家同類產品，具有以下*的優點：

①高特異性，270bp左右的一條陽性對照條帶，涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種，操作簡單，結果易于觀察。（使用MB的試劑盒，下表列出的支原體物種均為陽性，其他微生物或真核細胞均為陰性。根據16s rRNA序列的同源性比對，該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無膽甾原體和85種支原體。）

②高靈敏度，1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。

③試劑盒含內控對照，可防止假陰性的發生。

④符合歐洲藥典要求。

適用范圍

A. 科研用戶，細胞上清的篩查可選用MB公司生產的支原體常規PCR檢測試劑盒（一步法）。（詳見下文）

【Venor® Gem OneStep (貨號:11-8050)】或【Venor® Gem Advance (貨號: 11-7096)】

B. 對于需遵循藥典要求的生物制藥企業，可選用MB公司生產的支原體常規PCR檢測試劑盒（經典法）。

【Venor® Gem Classic(貨號: 11-1050) 】+ Taq酶 (貨號: 53-1050)】